WB实验结果图怎么制作

实验完成后用于文章中还需要对结果进行处理。在文章中有些直接放 wb 条带图就可以，但是一般趋势都很明显，也有一些会在下方标注相对灰度值，还有一些会添加柱状图展示其结果。 在这个过程中，我们通常用 ps 软件进行排版，然后用 image j 进行灰度值分析。 prism 软件作图，打开 ps 软件，新建一个画布，随后打开 wb 文件，选择标尺工具， 在起点位置单击鼠标按住不动，于终点位置松开，选择上方拉直图层，这样条带就是水平位置了，随后点击矩形框，选择工具 框住条带，移动制画布中。在不改变条带趋势的情况下，我们可以对图片进行曝光度调整。 同样方法把内餐拖入进来， 我们可以选中图片，点击编辑描边，设置描边宽度，描边色设置为黑色， 最后加上标注。 如果要进行灰度分析，我们利用 image j 打开之前排列好的 w b 结果图，选择 image j type， 确定其为 eight bits， 然后选择 process subject background， 去除背景色，然后点击 analyse set measurements， 选择面积平均密度灰密度，然后点击 analyse set scale， 设置为 pixel， 然后选择矩形框工具，框住条带，然后选择 analyze gels select first lane， 然后再次选择 analyze gels， 选择 plot lanes。 几个孔对应结果封，选择直线工具，将开口的封封闭， 最后选择魔棒工具，依次点击各风弹出的对话框中就是个孔的灰度值。同样方法我们可以获得内参的灰度值， 我们需要将目的条带灰度值除以内参条带灰度值。最后对数值进行均一化处理 及对照组长设为一，其他孔为相对于对照组的倍数。然后我们可以把最后的数据结果写在条带下方，也可以总结三次重复实验结果做成柱状图放在条带旁。 对于 wb 结果，条带的灰度值表示其不同处理下，相对于对照组的蛋白含量、表达量高低情况。下期我们学习 q p， c r。

看到大家投稿的 wb 结果图，我们实验室做 wb 第一高手老邓有话说。

这个位置就是咱们计算出来的数据，他自己有每一列数据的对应的名称，咱们需要把每一列对应的名称放到这个表格里边，咱们就沿用这一个或直接复制过来， 然后把咱们计算的内餐的数据粘贴过来就可以了。 然后咱们接下来计算指标的绘图值，同样的操作进行参数的一个设置，嗯，在第二次点进去之后，嗯，第一次咱们操作完了，他电脑这个这个流程就是默认的直接点 ok 就可以了。然后第二步依然需要咱们手动清零点， ok， 嗯，紧接着还是要给他反射一下，然后依然在选择方框，把咱们要计算的计算条带的会 图纸给它框住，英文状态下点 m， 依然是每一个条带都需要计算，计算完成之后可以把这个图片关掉，咱们计算的 这个还是给他粘过来，咱们计算的指标名称放到这个位置，然后是数据对应的粘过来，可以关掉了，然后进行第二个指标的计算， 同样的操作流程，他这个是默认的记住的这个依然需要受动清零，和前两个步骤一样，计算完成后把数据粘过来，然后三张膜的灰度值咱们就已经计算完了。计算完了之后，嗯，咱们这边需要的咱们 通常用到的是蛋白相对表达量，那蛋白相对表达量咱们是怎么计算的呢？就是用木粒蛋白的灰度比上内餐的灰度值，那内餐所有的用的都是统一的一个内餐，那我直接粘过来就可以， 然后进行蛋白相对表来量的计算，是目的蛋白的汇度值，也就是咱们这个指标调带的汇度值比上内餐调带的汇度值， 然后得出来的这个位置的数据，就是咱们用到的蛋白相对表达量。然后还有一个这个位置，这个呢是咱们每一个条带他对应的一个名称。嗯，我现在在这里就直接沿用这个了啊， 然后这样一个完整的呃，咱们的 w b 的数据计算就算操作完了。

这是 bca 法测出的蛋白浓度原始数据。下面我们进行数据处理，调平蛋白浓度。 打开数据处理模板， 按本次样本数目进行表格的修改。 数错了重新来。 把原始数据粘贴过来， 开始计算标准曲线数据。 开始绘制标准曲线， 计算样本，减本地浓度， 带入标准曲线工式计算样本浓度。 c 五四乘一比，五， 四为溶质的量，五为最终蛋白浓度。溶质除以浓度等于体积。 保存文件调平蛋白浓度结束。

打开玻璃板，用双蒸水清洗，放入板夹，无水乙醇再次冲洗，安装至治胶底座，无水乙醇验漏吹干缓慢加入分离胶， 无水以纯液封制，分离胶凝固加浓缩胶插加样梳，浓缩胶凝固后取出，拔出加样梳，放入电泳槽， 槽内加入电永液，再加入蛋白样品及蛋白预染。 marker 检查正负极后，盖上盖子，设置电永程序，开始电永，电永结束。取出玻璃板，小心撬开，切掉多余的胶，将胶 放置转模，加黑色板一侧盒盖顺序，红色板加海绵绿纸膜胶绿纸海绵黑色板夹排气盒盖插入转模槽中，加入冰盒确认正负极，盖上盖子，设置转模程序，开始转模。 取出转膜夹后收集 pvdf 膜进行清洗，加入百分之五脱脂奶粉封闭，随后回收脱脂奶粉 tbst 清洗三次，加入一炕，再放入冰箱四度过夜，次日收集一炕， 清洗三次，加入二 com， 呼吁二 com 完成后回收二 com t b s t 清洗三次结束后，将摩毡师显色剂反应五秒放入暗盒曝光，三到五秒就可以观察调带结果了，你学会了吗？

咱们是爱博士实验加油站，咱们每周呢都会进行实验，呃，讲座就这种理论的一个讲解， 这个讲解呢不会特别特别的深入啊，这个讲解我们也看到了，今天咱们要讲好多个实验，所以是帮助初学的同学对这个实验的原理大的步骤有一个认识，能帮助大家后续的更好的去学习，这是这个讲解的一个目的。然后我们后续呢还会出每一个实验的专项讲解， 明白吗？专项讲解，专项讲解的话呢，咱们就会讲的很详细了啊，就会把这一个实验给大家去讲透，所以这个是咱们整个的一个系列讲座的一个安排啊，所以现在是咱们的呃，就是初步的一个认识。 然后除了这个以外呢，咱们工作日呢，还会有咱们的一个实操讲座啊，一个实操直播就不能叫讲座了，也就是咱们实验室的技术老师在做实验，那我会给大 下去呃，播啊，包括也是咱们展示出来的，这么多时间都是会有的。嗯，好了，那咱们就开始了啊，那按同学们刚才报的啊，我们饺子同学授奖期我也都收到了啊，那咱们有同学要听 west， 所以咱们就从 west 开始，按这个顺序，好吧。嗯，来，那咱们就开始了啊。 然后呢，各位同学，咱们这个爱博社的首页有这个群聊啊，可以进一下咱们的首页的实验技术交流群， 这样的话，后续的有这种讲座或者是实操直播，我会在群内喊大家，大家有任何实验问题可以在群内提问，那个群里面咱们现在是有将近一百人了，但是问问题的同学比较少哈，所以大家不用腼腆，那有实验疑惑，或者说文章写作疑惑，在群内去互相交流就可以了，好吧，嗯， 来吧。首先每一个实验呢，我们都会给大家去讲他的一个应用，这个 wister 实验都能干什么？第一个他是对蛋 白啊，他研究的是蛋白质，他是对蛋白定性的，我们开始了，他是对蛋白定性的。所谓的定性啊，之前我发视频，有同学就问我，啥叫定性呀？定性呢？就是这是什么蛋白，对蛋白进行一个鉴定，定性就是他是什么蛋白， ok 吧。然后呢，第二个他的就是呢 对蛋白进行呃，定量，这个定量呢，并不是绝对定量，绝对定量就是说他的蛋白里的就是这个样本啊，咱们都是样本啊，这个样本当中这个蛋白的量是到底是多少？这叫绝对定量。而我们这个 western 实验呢，是半定量 啊，注意，是半定量，这个在实验当中，这个词所谓的半定量就是相对定量，就是相对定量， ok 吗？这样大家其实就应该懂了，他可以测的是样本间 相对蛋白料，也就是说这个是管这个一号管啊，一号样品是这个二号样品当中目的蛋白表达量的多少倍，是比他多还是比他少？是他的多少倍， 这叫样本间的相对定量，明白了吗？所以 wes 分实验呢，它对于蛋白的定性是更好用的。如果是定量呢，也能定量，但是样本间的相对定量，是的，可以这么理解啊，就是样本之间的比较，能比较出他们之间我比你多还比你少，我是你的几倍这种啊，这也是相对的，样本之间的相对的。 ok， 那这样的话其实就完事了，这就是 restant 的一个应用，如果大家之后呢，在呃实验当中涉及到了咱们的这个蛋白质的一个研究，那我需要去研究我这个动物体内啊，或者说人体当中是不是有这种蛋白，那么我们是不是就用蛋白的 restant 就叫蛋白的病性啊？如果呢，我通过 就是研究某一种药物，然后呢，我想研究这种药物对某一种蛋白他的表达的一个影响，对吧？那我们是不是就是可以拿小鼠啊，然后这个药的量一直变大，变大，加药的量越来越多，或者说时间越来越长，然后这就是不同组的实验，看看这个蛋白的一个他表达的量的多少， 是吧，所以我们其实用样本间的相对定量也是可以的。 ok， 好嘞，嗯，欢迎我们吃炸鸡同学关注了咱们这个，只关注了爱博士哈。好嘞， 来，然后咱们下边再来看这个 westen uh blog 实验的一个原理，他呀，采用的是就是他的一个很核心的步骤啊，一个大的步骤是聚丙气酰胺凝胶电泳。这个电影呢，很多如果是直接是学生物或者是 咱们的医学生的话，肯定都做过电影的实验的，这个电影实验呢，都是类似的啊，电影的话，在 west 实验当中的电影是 分离蛋白质的电影，这部是分离蛋白质的，然后呢，被检测的蛋白是碳，被检测的物质是碳白蛋白，然后碳针呢，是抗体显色，是用标记的二抗，这是他的一个整体的核心原理，然后他的一个大体的步骤啊， 就是呃，经过配置分离的蛋白质样品转移到呢故相载体，例如咱们的 pvdf 膜故相载体呢，以非控加键的形式吸附蛋白质， 然后与对应的抗体期免疫反应，在与酶或同位素标记的第二抗体期反应，经过底物检测，然后怎么怎么样了。所以这块啊，其实既是原理，也是 rest 的主要实验步骤，给大家再来分解一下啊。 首先这个 pag 呢，就是咱们说的这个聚丙器，先按凝胶电影的一个简称啊，配置啊，这是咱们的这个电影，这部电影呢，它的目的是分为蛋白质样， 这个电影啊，给大家说清楚，大家方便记忆啊。在电影当中，这个电影呢，它里头那个胶啊，就是像蜘蛛网一样啊，那个胶就像蜘蛛网一样，所以说是有这种小孔的，胶的内部啊，都有这种小孔。然后我们这个蛋白呢，如果他大 就是他更大啊，那他跑的就慢，因为他受这个孔的阻碍力就更大，如果这个蛋白呢，非常的小巧，那他在这个胶里头啊，这些小孔里头跑的就快。所以说呢，我们在电影当中蛋白分子量大的跑的慢， 在这个电影当中啊，蛋白分子量小的他跑的就快，因此呢，在这个电影的时候，我们能够按照蛋白的分子量不同进行这个蛋白的一个分离，那这个电影这部主要就是分离蛋白质啊，我们本身提出来的样本是人体当中的所有蛋白的啊，是我们样本当中的 全部的总蛋白，而我们呢，要把这些蛋白呢，按蛋白的大小进行分离，这一步能够 get 到了是吧？然后分离之后呢，还不够，因为啊，我们这里边呢，需要给他转移到故向载体上， 我们这个啊，一会会给大家去展示一下视频，还有咱们呢实操直播的时候，如果大家真的要学万斯坦，你真的应该看看实操直播啊，非常的形象了。那么咱们这里边呢，这个配置的话是胶，那个胶啊，就像果冻似的，一个是他容易坏 啊，容易碎，一碰就坏了，再有一个呢，这个胶啊蛋白是在胶的里面，所以他在后续的敷于抗体的时候是不容易敷于抗体的，不容易，不方便后续的操作，所以咱们需要把胶内的蛋白给他转移到这种比较结实的 这种膜上，所以这一步操作呢叫做转膜。大家先理解我们整个的大的过程啊，先把这个蛋白质 给他按照大小不同给他分开啊，这都是咱的蛋白质，然后我再把这些分开的蛋白质呢，从一个类似于果冻的胶上给他转到一个比较结实的一张膜上啊，这不就叫转膜给他转过来 ok 吗？然后这个故乡载体呢，是以非共家电的形式吸附蛋白质作为抗原的， 然后呢与对应的抗体勤勉一反应。所以其实我们 vis 团的原理啊，咱们说原理的话，第一条原理就是抗原和抗体的特异性结合， 这个大家应该都知道，是吧？抗原和抗体特异性的结合，也就是说呢，一种特定的抗体，他就是识别一种抗原，而我们这里边蛋白质就是抗原。 那如果我假设啊，咱们一般在研究的时候都是说，我知道我，我要研究的是什么蛋白，那么我就用这个蛋白对应的抗体就可以了，是吧？所以说呢，我用抗炎和抗体的这种特异性的结合，我就买我的目的 蛋白的抗体，然后这个抗体呢，只会和其中的，哎，我的这个目的蛋白结合啊，只会和我的这个目的蛋白结合，所以这一步的记第一个原理就是抗原和抗体的特异性结合啊，在与什么呢？没标记的第二抗体，其反应这部用的还是抗原抗体的特异性结合 这个蛋白呢，这个目的蛋白啊，我们就是抗原了，然后呢，我买能和他特异性结合的抗体，所以说这个是一抗，然后啊，我们的二抗 还能和一抗进行特异性结合，这也是利用抗原抗体的特异性结合，这个时候就把这个一抗当成抗原了，然后二抗就是抗体了， 然后这个二炕呢，我是用煤去标记的这个小三角就就相当于是一个标记物啊，这个二炕呢，我是给了他一个标记物，然后这个标记物怎么的呢？经过底物的显色能够显影，所以这里边呢是 没标记的二炕啊。第二个原理就是没标记的二炕这块很重要，因为后边同学们还想听以来啥，是吧，他的原理用的也是这个，所以同学们这块听清楚好吗？啊，老师讲的都是很重要的东西啊，所以第二个原理呢，就是没标记的这个二炕，他咋的呀？与底物反应， 这底雾你也别管是啥了。好吧，我们现在就是讲初步的东西，就是和一个物质啊，他反应能够显色，能够显色就够了， 所以说我们歪斯顿的核心原理其实就是这两部是他内在的一个原理的啊，那么这块呢，就能够显色了呗。所以啊，这里边再给大家说说，这个不是我们要研究的把蛋白吗？对吧？然后这个依靠啊，和他特异性结合了， 如果一抗和他结合了，那么二抗又和一抗结合，所以整体来说呢，这个目的蛋白，然后一抗，然后二抗，这个二抗不是 用这个眉标记了吗？一会我再在这个里头加点底物，就是显色剂，他就能显色了，用那个仪器一照呢，就能显影了，明白这意思了吧？所以说呀，我们只有这个位置在结果的时候会显影，就是呃，万斯坦的话就是一个条带，在这会出现一个条带， 明白我的意思吗？就只有这一块是我们的木地蛋白，只有他能和一抗特异性结合，而一抗又和二抗特异性结合，所以只有这个位置会连上这个酶，然后连上酶加底物，只有这个位置才显影，所以只有这个位置才会出现咱们的目的蛋白， ok 吧？然后呢，我们这个 wifi 实验的话，还会有一个马克，这个马克这个东西啊，特别初学同学可能，哎，这又是啥呀？你就把它理解成是一个尺子，马克啊，马克就像一个尺子一样，他呢就是呃 呃，出来一个小杠，一个小杠的，这个每个小杠啊，都是代表了蛋白的一个分子量，他的一个大小，所以说呀，如果我们的这个目的蛋白啊，他假设呢是六十五这么大的， 然后这块呢，刚好是这个六十，然后这个是七十，所以他在这两个横杠之间，那他不就是六十五的大小吗？对不？所以通过 max 呢，我们能够粗略的判定，这个就是咱们的那个把蛋白，因为他确实大小就是在六十，六七十之间就六十五啊，再有一个在六十五这块他确实显影了， 所以说明他和一抗结合了，然后呢一抗又和二抗结合了，这样他才能显出颜色，能够 get 到这个点吗？就只要说在这个六十五这个大致的位置出现显影了， 那就说明一抗和它结合了，二抗又和一抗结合了，那这个一抗只能特意性的和目的蛋白结合，所以只要这块出现影了，就说明我们的这个蛋白 是表达的是有的，明白这意思了吧。所以整体来说 y 四分的一个原理就是这两步抗原和抗体的特异性结合，还有呢就是没标记的二抗与底物能出现颜色反应， ok， 非常好哈，那这块有问题同学们随时提问啊。 然后大家如果有具体的问题呢，可以在这个咱们主页啊，就是爱博士点头像，然后主页的话有一个群聊， 呃，对，就点头像，然后左下角就有群聊啊，然后大家有时间，具体的时间疑惑可以在这里面去提问。嗯，后续的话大家有时间问题，我们就在群里面去交流就好了啊。来，那咱们就往下了啊，来，继续 好了，下边呢就是我们给大家分出来的啊，咱们 western 的呢，主要的一个实验步骤，首先呢咱们肯定是收集蛋白样品，因为 western 实验他检测的就是蛋 蛋白质啊，所以咱们得从细胞或者组织当中把蛋白质给他提出来，所以这里边收集蛋白样品啊，就是提蛋白，这里边呢，咱们一般来说就是用这个蕊帕细胞裂结液，很简单的啊， 把这个细胞给他那个裂解出来，然后蛋白呢就出来了，再离心，然后呀再去就是一些操作啊，超声什么的，然后我们把蛋白呢给他提取出来。这块具体的步骤咱们今天的讲座是不讲的啊，等我们出 yistern 的专项讲座的时候，会给大家直讲， yistern 讲的很详细。 好了，然后这块呢，下一步就是电影操作了，电影的话呢，就是我们刚才讲的是为了分离蛋白，所以现在再帮大家捋一遍， 非常的清晰了，就啊来再跟一遍。首先第一步呢，我把蛋白给他提出来，这个提出来呀是组织或者细胞当中的所有蛋白，我就拿一个样品，一个试管为例啊，所以呢，我把所有的人体当中的蛋白都在这 提出来了，那这些蛋白提出来之后呢，我做一个电影，这个电影是不是能把提出来的这些蛋白按照分子的大小不同给他分离开，所以呢，哎， 这个越往上的是越大的啊，因为大的跑的慢了，然后跑的越快的他就跑到下边了，所以说下边这是小的蛋白。明白这意思了啊，那电影这部就是把这个蛋白给他分离开了，然后呢，这个胶啊， 电影里的教的不结实，他像果冻似的，而且呢他不利于后续的这个一看二看的富裕，所以我们还要转模， 就这样就能记住了，然后转膜这步呢，就是给这个我们分离出来的这个吧，给他再转到这个膜上啊，转膜，然后转膜之后下边有一步啊，就这第四步，很多同学就是一个简单的小步骤，但是他很重要。嗯，这个转膜之后为什么要封闭？咱们现在直播间的同学， 我看有多少人啊？大家，哎，有十四人啊，大家有会万斯腾实验的吗？就我们为什么要封闭呀？封闭是干啥呀？ 这个封闭呢就是用脱脂奶粉，把这个膜啊，把这个膜放到脱脂奶粉里边，然后呢给他封闭一段时间，摇啊，摇在摇床里边，这就是封闭，就很简单的一步，但是为什么要有这步？这步其实很重要，就是我们现在的这张膜啊，我们的这张膜一般的咱们实验室是用 pvbf 膜， 也可以用这个 nc 膜啊，这个膜的话有常用的就这两种，像尼龙膜基本上都淘汰了。好了，那为什么这个要封闭呢？就说我们转完膜的这张膜啊，除了蛋白以外，这些空白的地 也是有结合蛋白质的能力的，就这张膜上他是有不饱和的结合胃点的，就这张膜是有结合蛋 白质的能力的，像这个空白的这些地啊，他都能结合蛋白啊，就明白这点就可以了啊，他呢是有不饱和的结合胃点，所以说这些空白的地方都能结合蛋白质。而我们的一抗和二抗就这些抗体啊，他本身都是蛋白质 抗体，其实都是蛋白质抗体，抗原其实都是蛋白质，明白了吗？所以说如果不封闭的话，依靠能够结合到这个膜的所有位置上，就是依靠这个时候就不特异性结合了，因为整张膜都有结合蛋白的能力，所以若不去封闭依靠，就是不能特异性结合，它是整张膜都能结合的。 那一看如果整张膜都结合上去了，二看是不是又结合，一看也都结合上了，所以说整张膜都会显影，都会显影，那也就是说背景高，就说你整张膜都是黑的，没有调带整张膜都是黑的，那就是封闭这部没做好。

想要做 wb 一次就成功，又有什么失常的小技巧？请师兄吃饭，让他带你做皮蛋白测浓度之后用 ps 将所有浓度调到一致。嗯，一般上药量在二十微克左右。 应用液，卷膜液还有洗液都建议现配现用，建议每个指标都加上洋餐，方便知道结果不好的时候哪里出现了问题。

实验需要准备的材料有， 去培养机，在培养敏中加入 p b s 洗涤 摇晃去掉 pbs。 洗涤两次。 加入由 a b i 九幺幺六配置的细胞列结液， 用细胞刮刀将细胞全部刮下， 将刮下的细胞收集到 epp 管理 唯心曲上期哦 dc 测浓度。实验需要准备的材料有， 加入等量的二成 logo 发货 煮十分钟， 放入零下二十摄氏度的冰箱里待用。 实验需要准备的材料有， 容器中加入电容缓冲液粉末， 倒入五百毫升蒸馏水，盖上容器盖子开始摇晃。将电容缓冲液摇晃均匀。做手动制胶可选用 以下世界， 将梳子缓慢垂直向上拔出， 可以用蒸馏水将涌到轻柔冲洗。将红色封条撕掉， 将预制将放入电泳仪。 将配置好的缓冲液倒入电泳仪， 将马克和样本加入泳道，滴入五维生马克 在外侧加入缓冲液。 电影已产生大量气泡。电影开始 三十分钟后，电泳中能看见晕染妈克清晰的条带，待秀芬兰好至底部，电泳结束， 考马思亮来染色。实验需要准备的材料有， all 香蕉从玻璃板中取出，放入敷浴盒中，用蒸馏水简单漂洗， 倒入烤马丝晾软，没过胶，放上摇床，调整摇床速度和时间。摇床摇两个小时， 姚智娇与康马斯亮蓝融为一体，关闭摇床。 实验需要准备的材料有， 加入拖 色液，没过胶，放入摇床， 摇至胶变为透明，条带清晰，期间需要更换两到三次脱色液。 实验需要准备的材料有， 将膜做好标记，放入甲醛漆 活一分钟， 开始进行转模。 三明治模型如图， 取出一半玻璃板，将膜盖在胶上， 将绿纸盖在膜上。 将海绵垫盖在绿纸上。 翻转，取下另一半玻璃， 盖上绿纸和海绵垫。 将三明治放入转印盒。将转印盒子放入转印仪，加入键转页 一小时后转模结束。关闭电源，打开盖子，将转印盒取出。 立春红染色实验需要准备的材料有， 将膜放入 tbs 机中，进行简单漂洗。将绿春红倒入呼吁盒， 放上摇床摇三至五分钟， 加入 t、 b、 s、 t 进行漂洗。 继续放向摇床摇晃三至五分钟， 染色完成。 实验需要准备的材料有， 转模结束。取出模， 倒入百分之五的牛奶， 放入摇床，封闭一小时， 加入 t、 b、 s 性，简单漂洗。 将敷浴盒放在摇床上漂洗三次，每次五分钟。 配置一套实验需要准备的材料有， 写上标记， 混匀，倒入敷浴盒。将膜放入， 放入冰箱。将呼吁盒放在摇床上。呼吁建议四摄氏度过夜，第二天从冰箱里拿出，放上摇床，室温平衡一小时， 将一趟丢弃，加入 t、 b、 s， t 洗涤三次，每次十分钟。 配置 rco。 实验需要准备的材料有， 赋予盒中加入对应的 alco。 将呼吁盒放在摇床上，呼吁一小时， 二抗呼吁结束。将呼吁盒中的二抗丢弃，加入 t、 b、 s、 d。 洗涤，洗涤三次，每次十分钟。 实验需要准备的材料有， 配置伊斯奥显影页， 吸取等量的 a 业和 b 业混凝。 将 e 四 l 显影液倒入敷浴盒中， 反应三十秒到一分钟。 将膜放入曝光仪器中进行曝光， 完成曝光，得到实验结果。